FAQS-武汉三羊开肽生物科技有限公司-多肽合成、合成多肽、多肽定制、基因合成，多肽修饰、荧光标记、二硫键、蛋白偶联、磷酸化-

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多肽合成相关
蛋白表达相关
抗体制备相关

1、提供哪些多肽定制服务？

三羊开肽可提供优质的多肽合成、快速多肽合成、多肽文库构建和大规模多肽合成服务。

2、多肽合成使用的是什么办法？

三羊开肽引进的是国外先进的固相合成技术，可以根据客户需求进行个性化的多肽定制。

3、最长可以合成多少长度的多肽？

三羊开肽可以合成长达189个氨基酸序列的多肽，可提供毫克级到千克级，纯度可达99%。

4、合成一条多肽，常规需要多久时间？

根据多肽序列长度和难易程度的不同，合成时间有所不同。常规多肽合成时间大约为2周。三羊开肽还可以提供快速多肽合成服务，最快可3天交付。

5、多肽采用何种形式发货？

三羊开肽的多肽以冻干粉形式发货，一般为灰白色，组成不同，多肽粉末的颜色有差异，储存在2ml离心管内，同时可按客户需求进行分装。

6、产品交付时提供哪些数据报告？

每条多肽均提供MS和HPLC报告。同时，我们还可以根据客户需求提供溶解度报告及内毒素测试报告。

7、多肽如何储存？

多肽想长期保存得话需要避光，并应保存在-20度环境内，尽可能地保持多肽稳定性；短期保存可以保存在4度环境内。短期运输中外界温度对多肽的有效期和质量不会有影响。

8、多肽合成中如果遇到问题该如何处理？

每条多肽都具有特殊的性质，在合成过程中有时不能达到预期的结果。如果由于一些特殊原因，三羊开肽不能成功交付多肽样品，技术人员将会及时与您沟通联系。

1、三羊开肽生物拥有哪些蛋白表达系统？

三羊开肽生物科技有限公司拥有完整的蛋白表达技术平台：包括原核蛋白表达与纯化、酵母蛋白表达与纯化、昆虫细胞蛋白表达与纯化、哺乳动物细胞蛋白表达与纯化。

2、如何选择合适的蛋白表达系统？

根据客户蛋白来源（细菌、动物或其它）和纯化蛋白用途的不同，选择不同的蛋白表达系统。如果不知道该如何选择，可以咨询客户进行推荐。

3、蛋白服务和长链多肽服务如何界定？

<50aa一般做多肽合成，>50aa多肽合成困难，可以尝试表达。

4、哪些因素会影响基因合成和表达的成本？

基因合成成本主要取决于基因的长度和复杂性。表达（蛋白质生产）成本主要受表达系统、目的蛋白质量和纯度，以及其他特殊要求如标签去除，内毒素水平控制，特殊标签等影响。

5、蛋白表达过程中，杂质有些什么？

杂质大多是细胞内或培养基内的物质，可以通过层析技术去除。

6、蛋白纯度最高可以做到多少？蛋白纯化后对应纯度蛋白应用有哪些？

纯度可以达到95%，Biacore和结晶对纯度要求较高，一般要求高于90%纯度，很难根据纯度界定应用。

7、能保证客户需要的蛋白有活性吗？

影响蛋白活性的因素有很多，所以无法保证蛋白的活性，但是三羊开肽会通过蛋白分析给出您在表达和纯化中的建议，尽量获得活性蛋白。

8、通常蛋白在什么条件下保存比较好？

将蛋白等量分装，在-80℃或液氮中长期贮存，并且要避免多次冻融。

1、抗原多肽设计应满足什么条件？

为了使生产抗体获得最佳效果，设计应满足一个基本条件：在免疫过程中，该抗原既不会产生过强的免疫反应，同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。

2、抗原多肽的序列长度是多少才合适？

通常我们会建议序列长度在8-20个氨基酸残基之间比较适宜，如果太短，就有多肽太特殊、所产生的抗体与天然蛋白之间的亲和力（结合能力）不够强的风险，同样，如果序列长度超过20，将有可能引入二级结构，所产生的抗体失去特异性的可能，而且肽链越长，通常合成难度增大，不易获得高纯度的产品。

3、制备抗体，通常是选择蛋白的N端还是C端？

为了避免识别区域隐藏在蛋白内部的风险，我们通常建议选择蛋白的N，C两端来产生的相应的抗体。因为在完整的蛋白中，N，C两端通常是暴露在蛋白表面的。然而，一定要注意膜蛋白的C端疏水性太强，不适合作为抗原。

4、可以使用肽抗原作为阳性对照在蛋白质印迹中测试抗血清吗？

肽抗原（未结合）的分子量 (MW) 太小，无法用于传统的蛋白质印迹 (WB) 测试。为了验证 WB 中目标条带的特异性，建议运行“抗体阻断”对照，使用肽抗原阻断一抗。推荐的出血稀释度为 1:1000（等于 1µg/ml），封闭肽约为 2µg/ml。

5、如果只用一个磷酸残基制造针对肽的抗体，当它在两个位点都被磷酸化时，它是否仍能识别该蛋白质？

如果蛋白质在两个位点都被磷酸化时，单一的磷酸肽抗体可以识别蛋白质。但是，如果蛋白质仅在一个位点被磷酸化时，双磷酸肽抗体也可以识别蛋白质。因此，很难开发出一种抗体能够保证蛋白质在两个位点都被磷酸化时才识别该蛋白质，而在只有一个位点被磷酸化时不结合。

6、如何定义优质抗体？

优质抗体是一种具有适当灵敏度和特异性的抗体，能够回答您的检测所提出的问题。但需要注意的是，一种抗体不一定适用于所有应用。

7、载体蛋白交联的方法是什么？

将载体蛋白加在远离抗体识别区域的一端，在序列中没有Cys的情况下在N或C端加上Cys为交联的首选方法。

8、如何确定是要选择单克隆抗体还是多克隆抗体？

一般来说，单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低。而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高。与单克隆抗体相比，大量多克隆抗体的生产相对快速且成本低廉，它们是非特异性的，因为它们能够识别任何一种抗原上的多个表位。

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