BaculovirusInsect ExpressionSystem
杆状病毒-昆虫表达系统

杆状病毒表达系统(Baculovirus expression vector system,BEVS),凭借其稳定的实验体系、高表达水平及翻译后修饰功能而被普遍认可为是一种表达大规模蛋白的强有力的工具。BEVS可以同时表达多个外源基因,在分泌生物活性蛋白的同时增加产量,还可以提供高活性的重组蛋白,解决在其它体系中无法解决的蛋白活性困难。  

服务优势

高表达水平:能够实现高水平的蛋白质表达,可达到昆虫细胞的天然表达水平。

大容量表达载体:杆状病毒表达载体具有较大的容量,可容纳较大的目标蛋白质基因。

蛋白质折叠和修饰能力:杆状病毒表达系统具有昆虫细胞的蛋白质折叠和修饰机制,可实现复杂蛋白质的正确折叠和修饰。

翻译后修饰:昆虫细胞能够进行正确的翻译后修饰,如糖基化和脂负载。

适用于多种昆虫细胞:杆状病毒可以感染多种昆虫细胞,包括昆虫细胞系和昆虫体内的细胞。

服务内容如下
服务项目内容交期
全基因合成分析基因序列,优化密码子,合成目的基因,提供载体1-2周
重组质粒的构建选用合适的载体,合适的标签(eg:His,GST,Fc,SUMO)构建重组供体质粒“pfastbacⅠ-target”(target代表目标基因)1周
重组杆粒的制备转化重组供体质粒至DH10bac感受态细胞,蓝白斑筛选阳性克隆并使用PCR反复鉴定,最后碱裂解小提重组杆粒1周
细胞转染复苏并传代悬浮培养的SF21细胞,使用化学转染试剂将重组杆粒转染入SF21细胞以制备P1代重组杆状病毒1周
重组蛋白的表达利用P1代杆状病毒制备P2代病毒、利用P2代病毒侵染大规模培养的SF21细胞以表达重组蛋白1周
重组蛋白的分离纯化及QC检测选用合适的色谱方法(eg:亲和、离子、分子筛等)分离纯化重组蛋白,并超滤换液至客户指定的缓冲液(如无特殊要求最终的保存缓冲液选择PBS或Tris-HCl)。QC检测包括:SDS-PAGE电泳检测重组蛋白纯度、BCA定量重组蛋白的浓度、Western-blot检测1周